耐热木聚糖酶基因的克隆表达及其在酶解玉米芯木聚糖中的应用

编号 zgly0001570004

文献类型 期刊论文

文献题名 耐热木聚糖酶基因的克隆表达及其在酶解玉米芯木聚糖中的应用

作者 李琦  陈明真  赵林果 

作者单位 南京林业大学化学工程学院  江苏省生物质绿色燃料与化学品重点实验室 

母体文献 林业工程学报 

年卷期 2017年04期

年份 2017 

分类号 Q55  Q78 

关键词 嗜热网球菌  木聚糖酶  克隆  水解 

文摘内容 为寻求具有耐热性能的木聚糖酶,笔者以嗜热网球菌（Dictyoglomus thermophilum）DSM3960的基因组为模板,克隆得到木聚糖酶基因xyn B-DT,该基因全长1 083 bp,共编码361个氨基酸,蛋白的理论分子量约为40ku。通过NCBI数据库比对发现该基因编码的蛋白质属于糖苷水解酶G11家族。实现大肠杆菌异源表达重组木聚糖酶Xyn B-DT,通过IPTG诱导,酶活达到30.6 U/mL。该重组木聚糖酶的最适温度为85℃,在6080℃范围内均有较好温度稳定性,在60℃条件下保温2 h,酶活维持在90%以上,在90℃下保温2 h,酶活尚残余约50%;最适pH为6.5,在pH为5.07.5范围内保温24 h仍可保留约90%剩余酶活力。该酶以Beechwood木聚糖为底物,米氏常数（Km）和最大反应速率(Vmax)值分别为5.63 mg/mL和1.572 mmol/(L·min-1)。以玉米芯木聚糖为底物,研究XynB-DT水解玉米芯木聚糖的条件及产物,结果显示在温度70℃、pH 6.0条件下酶解12 h,加酶量为400 U/g,最终酶解得率为44.3%,玉米芯木聚糖的水解产物主要以木二糖和木三糖为主,表明该木聚糖酶在低聚木糖制备方面具有较大应用潜能。