沙门氏菌和大肠杆菌O157:H7双重荧光PCR检测方法的研究

编号 zgly0001340629

文献类型 期刊论文

文献题名 沙门氏菌和大肠杆菌O157:H7双重荧光PCR检测方法的研究

作者 许如苏  林彩华  蔡颖  李辉  杨梓坚  陈冠武 

作者单位 广东省汕头出入境检验检疫局  上海超世生物科技有限公司  广东省汕头出入境检验检疫局 515031  515031 

母体文献 中国动物检疫 

年卷期 2008年03期

年份 2008 

分类号 S854.43 

关键词 沙门氏菌  大肠杆菌O157:H7  双重荧光PCR 

文摘内容 目的建立一种能同时检测沙门氏菌和大肠杆菌O157:H7的双重荧光PCR方法,应用于动物源性食品的快速检验。方法根据沙门氏菌invA基因和大肠杆菌O157:H7 RFBE基因的保守序列,设计引物和探针,通过优化反应条件,建立可同时检测沙门氏菌和大肠杆菌O157:H7的双重荧光PCR方法,应用于动物源性食品的检验,并与miniVIDAS快速初筛方法和SN标准方法进行比较。结果本研究建立的双重荧光PCR方法可同时快速检测沙门氏菌和大肠杆菌O157:H7,对纯菌的检测灵敏度均低于10CFU/双重荧光PCR反应体系。应用本方法检测36株标准/参考菌株,结果只有9株目的菌标准/参考菌株出现特异性扩增,其余27株非目的菌均呈阴性反应。定量检测重复性试验结果,批内和批间的变异系数均小于2%。应用本方法检测人工染菌样品,结果与miniVIDAS和SN方法检测结果一致,但检测时间比miniVIDAS快了3倍,比SN标准快了10多倍。结论本研究建立的双重荧光PCR方法具有快速、灵敏、特异、重复性好的优点,可在8小时内完成样品沙门氏菌和大肠杆菌O157:H7的检验。