抗草甘膦基因的克隆及在原核表达系统中的功能分析

编号 zgly0001420289

文献类型 期刊论文

文献题名 抗草甘膦基因的克隆及在原核表达系统中的功能分析

作者 赵特  林朝阳  徐晓丽  方军  沈志成 

作者单位 浙江大学农业与生物技术学院昆虫科学研究所  河南农业大学植物保护学院 

母体文献 植物保护 

年卷期 2012年03期

年份 2012 

分类号 S188 

关键词 抗草甘膦  16S rDNA  克隆  原核表达 

文摘内容 为了克隆抗草甘膦基因并在原核表达系统中分析其抗性水平,利用200μmol/L草甘膦平板从草甘膦严重污染的土壤中筛选到1株抗草甘膦菌株G6PP,经电镜和16SrDNA鉴定为恶臭假单胞菌;以该菌株基因组DNA为模板,通过PCR方法扩增出5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸酯合成酶(EPSPS)基因,该基因编码440个氨基酸,亚克隆到原核表达载体pEET-28a中构建原核表达载体pET-G6;将重组表达载体转化大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导,表达出46ku的融合蛋白;携带pET-G6质粒的大肠杆菌BL21(DE3)在液体M63培养基中能耐受150μmol/L草甘膦的抑制。本研究结果表明克隆到的G6基因具有一定的抗草甘膦活性,对抗草甘膦作物的培育具有实践意义。