草莓Fra a基因的克隆与原核表达

编号 zgly0001639745

文献类型 期刊论文

文献题名 草莓Fra a基因的克隆与原核表达

作者 李瑞玲  叶云天  江雷雨  刘勇强  叶宇芸  李亚丽  肖婕  李欣  汤浩茹 

作者单位 四川农业大学园艺学院 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2018年11期

年份 2018 

分类号 Q943.2  S668.4 

关键词 草莓  过敏原蛋白  克隆  原核表达  黄酮类化合物 

文摘内容 草莓Fra a是一类过敏原蛋白。为研究Fra a蛋白致敏机理,本研究根据已知的栽培草莓(Fragaria×ananassa)Fra a序列设计引物,从红颜草莓中克隆得到三个Fra a基因序列,其ORF长度分别为483 bp、483 bp和480 bp,各自编码160个、160个和159个氨基酸,分别命名为Fa Fra a 1、Fa Fra a 2和Fa Fra a 3。生物信息学预测表明其均具有bet v 1家族保守结构域,预测蛋白均无跨膜结构域和信号肽。Fa Fra a 1与桃的氨基酸相似度为81%,李、杏为80%;Fa Fra a 2与月季的氨基酸相似度为82%,苹果、樱桃为81%;Fa Fra a 3与月季的氨基酸相似度为92%,苹果为83%。Fra a与蔷薇科植物的进化关系更近。构建原核表达载体pET32afraa1、pET32a-fraa2和pET32a-fraa3,转化到大肠杆菌BL-21(DE3)p Lys S菌株并诱导融合蛋白表达,结果表明目的蛋白Fra a 1、Fra a 3在原核表达系统中能顺利表达,Fra a 1在上清、沉淀中均有大量分布,Fra a 3主要存在于沉淀中。未得到Fra a 2目的蛋白。本研究为进一步了解Fra a的功能和制备抗体提供了理论依据。