家蚕G蛋白α亚基基因BmGα73B原核表达及其表达条件优化

编号 zgly0001422373

文献类型 期刊论文

文献题名 家蚕G蛋白α亚基基因BmGα73B原核表达及其表达条件优化

作者 汤强  方玲  章玉萍 

作者单位 芜湖职业技术学院  安徽省农业科学院蚕桑研究所 

母体文献 中国蚕业 

年卷期 2012年03期

年份 2012 

分类号 S881.26 

关键词 G蛋白α亚基  BmGα73B  RT-PCR  克隆  原核表达 

文摘内容 通过RT-PCR技术从家蚕中扩增出G蛋白α亚基基因BmGα73B的cDNA,克隆至原核表达载体pET-41b(+)中,所获得的重组质粒经酶切鉴定后,将其转化至E coli BL21诱导表达,用SDS-PAGE与Western blot对表达产物进行鉴定。结果表明,通过RT-PCR扩增获得长度为1 158 bp的蛋白基因,诱导表达重组质粒pET-41b(+)-Gα73B,经SDS-PAGE检测,IPTGr的终浓度为1 mmol/L时,诱导4 h时蛋白表达量最高,出现分子质量约为73 kD的目的蛋白带,与蛋白的理论值相符。经Western blot检测,表达产物可与GST发生特异性反应。