华扁穗草ISSR-PCR反应体系优化及引物筛选

编号 zgly0001469344

文献类型 期刊论文

文献题名 华扁穗草ISSR-PCR反应体系优化及引物筛选

作者 包蕊  胡延萍  王莉  旭荣花  李毅 

作者单位 中国科学院西北高原生物研究所  海西州科学技术局 

母体文献 中国草地学报 

年卷期 2014年06期

年份 2014 

分类号 S548 

关键词 华扁穗草  ISSR-PCR  反应体系  正交试验设计  引物筛选 

文摘内容 利用正交试验设计方法,对影响华扁穗草ISSR-PCR反应中Mg2+、Taq DNA聚合酶、dNTP、引物和DNA模板等5个因素进行优化筛选,以期建立最佳反应条件。同时,筛选扩增条带清晰稳定的ISSR引物,经退火温度试验得到各个引物的最佳退火温度。结果表明:华扁穗草20μl ISSR-PCR最佳反应体系包括1.80 mmol/L Mg2+、0.80U Taq DNA聚合酶、0.100mmol/L dNTP、0.6μmol/L引物和20ng DNA模板;筛选出扩增条带清晰稳定的10条引物。体系验证和引物筛选试验表明,其在华扁穗草不同个体中能够扩增出条带清晰、稳定性好的条带,可用于后续华扁穗草遗传多样性分析,为华扁穗草野生资源保护和优良牧草种质资源选育提供理论依据。