光萼荷属植物SRAP-PCR反应体系建立与引物筛选

编号 zgly0000796955

文献类型 期刊论文

文献题名 光萼荷属植物SRAP-PCR反应体系建立与引物筛选

作者 张飞  王炜勇  张智  葛亚英  沈福泉  郁永明 

作者单位 浙江省农业科学院花卉研究开发中心 

母体文献 中国农学通报 

年卷期 2012,28(10)

页码 173-178

年份 2012 

分类号 S682.1 

关键词 光萼荷属  SRAP  正交试验设计  反应体系优化  引物筛选 

文摘内容 为了建立光萼荷属植物(Aechmea)SRAP-PCR反应体系,为今后光萼荷属植物种质资源研究提供技术支持,通过L16(45)正交试验设计,对光萼荷属植物SRAP反应体系中的Mg2+、dNTPs、Taq DNA聚合酶、引物和模板DNA浓度等5个因素进行优化试验,并筛选多态性SRAP引物组合。结果表明,光萼荷属植物的最佳SRAP反应体系为1.50 mmol/L Mg2+、400μmol/L dNTPs、1.5 U Taq DNA聚合酶、15μmol/L引物、30 ng模板DNA及1×PCR buffer。各因素对SRAP-PCR扩增反应结果影响的差异较大,依次为模板DNA〉Taq DNA聚合酶〉dNTPs〉引物〉Mg2+。从56对SRAP引物组合中筛选出51对扩增条带清晰、多态性丰富的SRAP引物组合,多态性引物比率达90%以上。通过不同光萼荷属植物和不同引物组合对该反应体系进行验证,均获得了多态性丰富、条带清晰的扩增图谱,表明本研究建立的光萼荷属植物SRAP-PCR反应体系稳定可靠。