金佛山方竹ISSR-PCR反应体系的建立与优化

编号 zgly0001749823

文献类型 期刊论文

文献题名 金佛山方竹ISSR-PCR反应体系的建立与优化

作者 刘伊苒  鞠壮  邓珺杭  师云凡  丁显平 

作者单位 四川大学生命科学学院  特色生物资源研究与利用川渝共建重点实验室 

母体文献 林业科技通讯 

年卷期 2022,(11)

页码 22-26

年份 2022 

分类号 S795 

关键词 金佛山方竹  Chimonobambusa utilis  ISSR  体系优化  引物筛选 

文摘内容 以金佛山方竹(Chimonobambusa utilis)的幼嫩叶片为实验材料,采用单因素分析的方法对金佛山方竹的ISSR-PCR反应体系及反应程序进行优化,成功筛选出12条有效引物,并逐一确定了其退火温度。以引物UBC825(ACA CAC ACA CAC ACA CT)为例对体系中的Taq 2×PCR Master Mix用量、引物浓度、模版DNA用量、退火温度、循环次数进行研究。结果表明,25μL的反应体系,其中含16.5μL Taq 2×PCR Master Mix、0.6μmol/L引物、80 ng模版DNA。相应的反应程序为95℃预变性3 min;95℃变性30 s,55℃退火30 s,72℃延伸90 s,30个循环;72℃延伸5 min,4℃保存。该反应体系的建立与优化可为后期分析金佛山方竹遗传多样性及亲缘关系提供一定的理论基础。