朱顶红SRAP-PCR反应体系的建立和优化

编号 zgly0001566340

文献类型 期刊论文

文献题名 朱顶红SRAP-PCR反应体系的建立和优化

作者 孙翊  张永春  殷丽青  杨柳燕  李心  费如桂 

作者单位 上海市农业科学院林木果树研究所 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2017年05期

年份 2017 

分类号 Q943.2  S682.25 

关键词 朱顶红  SRAP  反应体系优化  正交设计 

文摘内容 本研究采用L16（45）正交试验设计方法,对朱顶红SRAP-PCR反应体系中的5种因素(Mg2+浓度,d NTPs浓度,引物浓度,DNA模板量和Taq DNA聚合酶用量)进行优化,结果表明各因素对朱顶红SRAP-PCR扩增反应影响大小依次为:d NTPs浓度>引物浓度>Mg2+浓度>DNA模板量>Taq DNA聚合酶用量。优化获得的朱顶红最佳SRAP-PCR反应体系为:1×PCR Buffer、Mg2+浓度2.0 mmol/L、d NTPs浓度0.2 mmol/L、引物浓度0.25μmol/L、20μL体系中DNA模板量80 ng以及Taq DNA聚合酶用量0.5 U。用10个朱顶红品种基因组DNA对所得最优体系进行验证,证明该体系具有较高的稳定性和重复性,能够为朱顶红遗传多样性研究和遗传图谱构建等提供重要技术支持。