一种简便有效的香蕉小分子RNA提取方法

编号 zgly0001484128

文献类型 期刊论文

文献题名 一种简便有效的香蕉小分子RNA提取方法

作者 王静毅  冯仁军  柴娟  陈友  张银东  马子龙  武耀廷 

作者单位 中国热带农业科学院热带作物生物技术研究所·农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室  中国热带农业科学院航天育种研究中心  海南大学农学院  琼州大学 

母体文献 果树学报 

年卷期 2015年02期

年份 2015 

分类号 S668.1 

关键词 香蕉  小分子RNA  提取 

文摘内容 【目的】提供一种简单、经济、高效的香蕉小分子RNA提取方法,以满足RT-PCR、Northern杂交等分子生物学研究的需要。【方法】以巴西蕉(Musa acuminata L.AAA group,‘Brazilian’)的叶片、雄花、果实和根系为材料,利用改良的CTAB法,结合使用PEG8000分级沉淀DNA和大分子RNA,从而获得小分子RNA。【结果】琼脂糖凝胶电泳显示小RNA带型清晰,无DNA和大分子RNA干扰,说明小RNA质量较好。获得的小RNA经紫外光谱分析其A260/A280的比值在1.872~2.020,产量可达35μg·g-1。以提取的各组织小分子RNA为模板,利用茎环RT-PCR方法在香蕉不同组织小RNA中均检测到mi RNA156a,其扩增片断大小约为70 bp,且测序结果与预测的香蕉mi R156a序列一致。【结论】本实验提供了一种简便高效的香蕉小分子RNA提取方法,可满足RT-PCR、Northern blotting及小RNA文库构建等后续分子生物学研究的需要,为研究人员在实际工作中提供了更多的选择。