杜鹃花ISSR-PCR反应体系的建立和优化

编号 zgly0000919187

文献类型 期刊论文

文献题名 杜鹃花ISSR-PCR反应体系的建立和优化

学科分类 220.1070;森林植物学

作者 王书珍  查三省  程呈  张传进  方元平  金卫斌 

作者单位 经济林木种质改良与资源综合利用湖北省重点实验室  大别山特色资源开发湖北省协同创新中心  黄冈师范学院生命科学学院 

母体文献 北方园艺 

年卷期 2015(14)

页码 111-114

年份 2015 

关键词 杜鹃花  ISSR-PCR  引物筛选  正交优化 

文摘内容 以杜鹃花为试验材料,采用正交实验方法,研究模板DNA浓度、ISSR引物浓度、dNTPs浓度、Taq DNA聚合酶浓度、Mg2+浓度等5个因素对ISSR-PCR反应体系的影响,以建立适合杜鹃花的ISSR-PCR最佳扩增体系。结果表明:杜鹃花ISSR反应体系的最佳条件为模板DNA用量为60ng/20μL,ISSR引物浓度0.60μmol/L,dNTPs浓度0.50μmol/L,Taq DNA聚合酶浓度30U/mL,Mg2+浓度为0.6mmol/L。采用该反应体系可以从10份杜鹃花(R.simsii)基因组内扩增出稳定性高、重复性好ISSR-PCR产物。