钝裂银莲花ISSR-PCR反应体系优化

编号 zgly0001618957

文献类型 期刊论文

文献题名 钝裂银莲花ISSR-PCR反应体系优化

作者 孙涛  刘左军  孙文斌  刘凤梅  李冰 

作者单位 兰州理工大学生命科学与工程学院 

母体文献 草业科学 

年卷期 2012年01期

年份 2012 

分类号 S184 

关键词 钝裂银莲花  ISSR-PCR  反应体系  正交优化 

文摘内容 本研究以改良的CTAB法提取的甘肃合作钝裂银莲花(Anemone obtusiloba)基因组DNA为模板,通过正交和单因素试验,探讨引物浓度、聚合酶浓度、Mg2+浓度、dNTPs浓度和模板浓度对银莲花ISSR-PCR扩增的影响。结果表明,钝裂银莲花ISSR-PCR最佳反应体系:总体积20μL,模板浓度20ng,聚合酶2 U,Mg2+浓度2.5mmol·L-1,dNTPs浓度0.3mmol·L-1,引物浓度0.4mmol·L-1,引物UBC807退火温度为51℃。