马蔺ISSR-PCR反应体系的建立与优化

编号 zgly0001339939

文献类型 期刊论文

文献题名 马蔺ISSR-PCR反应体系的建立与优化

作者 王康  董宽虎  孙彦  康俊梅  董洁  孟林 

作者单位 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所  山西农业大学动物科技学院  中国农业大学动物科技学院草地研究所  北京市农林科学院草业与环境发展中心 

母体文献 草地学报 

年卷期 2008年06期

年份 2008 

分类号 S54  S688.4 

关键词 马蔺  ISSR-PCR  反应体系  正交优化 

文摘内容 根据正交试验设计原理,设计探索正交试验和细调正交试验以确定马蔺(Iris lactealPall.var.chinensis(Fisch.)Koidz)ISSR-PCR反应体系中各成分的浓度,从dNTP、Taq酶、Pri mers、Mg2+4种因素对马蔺ISSR反应体系进行了优化,得到适合马蔺的ISSR-PCR最佳反应体系,即25μl的反应体系中含有dNTP 0.3 mmol/L、Taq酶1.5 U、Pri mers 0.4μmol/L、Mg2+2.5 mmol/L以及1×buffer和50 ng模板DNA。通过对马蔺ISSR-PCR最佳反应体系进行梯度退火试验,得到这条引物的最佳退火温度为52℃。这一体系的建立为今后利用ISSR标记技术研究马蔺遗传多样性奠定了基础。