长柄石杉ISSR-PCR反应体系的建立与正交优化

编号 zgly0000709611

文献类型 期刊论文

文献题名 长柄石杉ISSR-PCR反应体系的建立与正交优化

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 宋育红  叶祖禄  张杭颖  张君诚 

作者单位 福建省三明市三明学院应用生物技术研究所  福建省三明市三明学院化学与生物工程系 

母体文献 中国农学通报 

年卷期 2010(21)

页码 37-42

年份 2010 

分类号 Q943.2 

关键词 长柄石杉  ISSR-PCR  反应体系  正交优化 

文摘内容 长柄石杉ISSR反应体系的建立能为利用ISSR标记技术进行长柄石杉品种鉴别、分类、种质资源遗传多样性分析奠定良好基础。利用正交试验设计的方法,从dNTP浓度、TaqDNA聚合酶浓度、引物浓度和Mg2+浓度4种因素,对长柄石杉ISSR-PCR反应体系进行优化分析,并在此基础上对模板DNA浓度进行梯度检测。结果表明,20μLISSR-PCR反应体系中各因素的最佳浓度为1×PCRbuffer、300μmol/LdNTP、0.2μmol/L引物、2.0mmol/LMg2+、1.75UTaqDNA聚合酶、40ng模板DNA。该优化体系的建立为下一步进行长柄石杉ISSR分子标记奠定了基础。