编号 zgly0001486854
文献类型 期刊论文
文献题名 小熊猫源犬瘟热病毒DNA疫苗构建及其在真核细胞的表达
作者单位 广州动物园 广州海洋馆
母体文献 野生动物学报
年卷期 2015年03期
年份 2015
分类号 S858.93
关键词 犬瘟热病毒 DNA疫苗 载体构建 真核表达
文摘内容 根据Gen Bank中发表的犬瘟热病毒(CDV)的基因组序列设计了H和F基因的2对引物,通过RT-PCR扩增出从发病小熊猫分离的CDV的H和F基因,并将其克隆入到18T-simple载体上进行测序。使用Kpn I和Xho I限制性内切酶对重组载体进行双酶切并将目的基因克隆到pcDNA 3.1表达载体上,构建完成后转染293T细胞,转染48 h后,再利用RT-PCR和Western-blot检测目的基因的转录和目的蛋白的表达。结果表明,表达载体经转染后,在293T细胞中,目的基因均能得到转录而且正确表达。这为下一步基因疫苗的研究奠定了良好的基础。