香蕉枯萎病菌2个生理小种PL基因真核表达载体的构建与表达

编号 zgly0000807430

文献类型 期刊论文

文献题名 香蕉枯萎病菌2个生理小种PL基因真核表达载体的构建与表达

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 董章勇  秦世雯  王振中 

作者单位 仲恺农业工程学院农学院植保系  华南农业大学资源环境学院 

母体文献 西北农林科技大学学报: 自然科学版 

年卷期 2012(4)

页码 102-106

年份 2012 

分类号 S432.4 

关键词 香蕉枯萎病  香蕉枯萎病菌  果胶裂解酶  载体构建  真核表达 

文摘内容 【目的】:构建香蕉枯萎病菌1号小种(FOC1)和4号小种(FOC4)果胶裂解酶(Pectate lyases,PL)基因的真核表达载体,并进行诱导表达,为进一步研究PL在病原菌致病过程中的作用奠定基础。【方法】:将质粒pMD18-pl-foc1、pMD18-pl-foc4和真核表达穿梭载体pPICZαA进行EcoRⅠ和XbaⅠ双酶切反应,回收目的片段连接,转化至DH5α进行筛选扩繁,对菌落进行PCR鉴定后抽提质粒进行PCR和EcoRⅠ、XbaⅠ双酶切鉴定。将阳性载体线性化后电击转化毕赤酵母SMD1168感受态细胞,用甲醇进行诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE分析。【结果】:成功构建了FOC1和FOC4 PL基因的真核表达载体pPICZαA-pl-foc1和pPICZαA-pl-foc4,经甲醇诱导表达后分别获得了重组的PL蛋白,其分子质量约为23.4ku。【结论】:FOC1和FOC4 2个香蕉枯萎病菌小种的PL基因在酵母中得到了成功表达。