ErbB2受体酪氨酸激酶激酶区的表达与纯化

编号 zgly0000561514

文献类型 期刊论文

文献题名 ErbB2受体酪氨酸激酶激酶区的表达与纯化

作者 江希  周祥山  张元兴 

作者单位 华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室 

母体文献 微生物学通报 

年卷期 2008,35(9)

页码 1393-1397

年份 2008 

分类号 Q257  Q959.837 

关键词 受体酪氨酸激酶  毕赤酵母  克隆  表达  RTK活性 

文摘内容 以GFP融合表达的形式在毕赤酵母中表达具有生物活性的受体酪氨酸激酶ErbB2的激酶区。构建受体酪氨酸激酶激酶区与GFP的融合表达载体pPIC3.5K,转化毕赤酵母GS115,通过组氨酸营养缺陷型筛选,G418高拷贝菌株筛选,以及摇瓶诱导表达筛选,选取较高水平表达菌株进行5升罐培养,以镍亲和层析手段纯化得到蛋白表达产物,进行SDS-PAGE分析和酶联免疫反应检测酶活。结果表明在毕赤酵母中成功诱导表达了约100kD的激酶融合蛋白并具有激酶活性。该研究为筛选ErbB2的抑制剂奠定了基础。