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重组融合蛋白rTMP-GH在巴斯德毕赤酵母中表达的研究



编号 zgly0000576146

文献类型 期刊论文

文献题名 重组融合蛋白rTMP-GH在巴斯德毕赤酵母中表达的研究

作者 王崧  王军平  陈默  许杨  陈芳  申明强  王艾平  粟永萍  开丽 

作者单位 第三军医大学军事预防医学院防原医学教研室 

母体文献 第三军医大学学报 

年卷期 2008,30(21)

页码 2037-2040

年份 2008 

分类号 Q513  Q949.326.1 

关键词 rTMP—GH  毕赤酵母  表达 

文摘内容 目的实现TPO模拟肽(thrombopoietin mimetic peptide,TMP)与人生长激素(human growth hormone,hGH)的重组融合蛋白rTMP—GH在巴氏毕赤酵母中的高效表达。方法以含有rTMP—GH核苷酸序列的原核质粒为模板,PCR方法获得rTMP—GH的编码序列,并亚克隆至载体pPIC9K中,将所构建pPIC9K—rTMP—GH表达质粒转化酵母宿主细胞GS115,MD/MM平板及C418抗性筛选高表达株,然后进行试管补料分批表达,Western blot对表达产物进行鉴定,通过巨核细胞集落形成能力对其生物学活性进行初步检测。结果成功构建pPIC9K—rTMP—GH表达质粒,筛选到高表达rTMP—GH重组融合蛋白的巴氏毕赤酵母细胞株,初步证实所表达产物具有刺激巨核细胞集落形成的能力。结论成功实现了rTMP—GH融合蛋白在巴氏毕赤酵母中的高效表达。

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