编号
zgly0001383026
文献类型
期刊论文
文献题名
鹅源副黏病毒融合蛋白在毕赤酵母细胞中的表达
作者单位
吉林大学畜牧兽医学院
吉林出入境检验检疫局
辽宁出入境检验检疫局
母体文献
动物医学进展
年卷期
2010年09期
年份
2010
分类号
S852.659.5
关键词
鹅源副黏病毒
F蛋白
毕赤酵母
表达
文摘内容
应用特异性引物,从鹅源副黏病毒NA-1株中扩增出F蛋白基因,PCR产物纯化后克隆入pGEM-T载体,得到重组质粒pT-F。用EcoRⅠ和NotⅠ双酶切pT-F,回收目的基因F片段,并将其定向克隆到pPICZαA中,构建重组质粒pPICZαA-F。用PmeⅠ酶切pPICZαA-F使其线性化,电击转化至感受态毕赤酵母GS115菌中。PCR法鉴定阳性重组子,10 mL/L甲醇诱导表达后,进行SDS-PAGE及Westernblot分析。结果表明,在酵母菌培养基上清中检测到相对分子质量为63 ku的重组蛋白,该重组蛋白可与NA-1株鹅源副黏病毒多克隆抗体发生特异性血清学反应。