苹果褪绿叶斑病毒外壳蛋白基因的原核表达及抗血清制备

编号 zgly0001418833

文献类型 期刊论文

文献题名 苹果褪绿叶斑病毒外壳蛋白基因的原核表达及抗血清制备

作者 耿超  牟安丽  刘志强  李向东  周涛 

作者单位 山东农业大学植物保护学院植物病理学系  中国农业大学植病系 

母体文献 果树学报 

年卷期 2012年05期

年份 2012 

分类号 S432.41 

关键词 苹果褪绿叶斑病毒  外壳蛋白基因  原核表达  抗血清  组织印迹分析 

文摘内容 【目的】为了制备苹果褪绿叶斑病毒(Apple chlorotic leaf spot virus,ACLSV)的抗血清,【方法】将ACLSV外壳蛋白(Coat protein,CP)基因克隆到原核表达载体pEHISTEV和pEHISEGFPTEV,转化大肠杆菌Rosetta,切胶回收诱导表达的CP融合蛋白免疫新西兰长耳兔,制备ACLSV的抗血清。【结果】利用原核表达载体pEHISTEV和pE-HISEGFPTEV在Rosetta中分别表达出了分子质量为25 ku和55 ku的ACLSV CP融合蛋白。切胶回收25 ku的融合蛋白免疫新西兰长耳兔。经ELISA测定,所制备的抗血清效价为1∶1 024,Western blot及组织印迹分析表明抗血清能与ACLSV CP发生特异性的免疫反应。【结论】该血清特异性强,效价高,可用于苹果叶片、果实和枝条等样品中A-CLSV的检测。