编号 zgly0001321814
文献类型 期刊论文
文献题名 甘薯潜隐病毒外壳蛋白基因的克隆、表达及其抗血清的制备
作者单位 河南省农业科学院植物保护研究所 河南省农业科学院植物保护研究所 郑州450002河南农业大学植物保护学院 郑州450002
母体文献 植物病理学报
年卷期 2007年03期
年份 2007
分类号 S435.31
关键词 甘薯潜隐病毒 外壳蛋白基因 序列分析 原核表达 抗血清
文摘内容 根据已报道的甘薯潜隐病毒(Sweet potato latent virus,SPLV)外壳蛋白(CP)基因的核苷酸序列合成引物,利用RT-PCR方法克隆了SPLV河南分离物(SPLV-HN)的CP基因及部分3′端非编码区序列,序列分析表明,SPLV-HN CP基因由879个核苷酸组成(GenBank登录号为DQ399862),编码293个氨基酸残基。与GenBank中SPLV-CH(X84011)和SPLV-T(X84012)分离物的核苷酸序列相似性分别为96.8%和93.0%;与日本分离物(E15420)的核苷酸序列相似性为83.6%。将CP基因克隆到原核表达载体pET-30a(+)上,SDS-PAGE分析表明,经IPTG诱导,CP基因在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中得到了高效表达。以表达的蛋白为抗原,免疫家兔,制备了SPLV外壳蛋白的特异性抗血清。ACP-ELISA检测结果表明,制备的抗血清可用于田间甘薯样品的检测。