甘薯脉花叶病毒外壳蛋白基因在大肠杆菌中的表达及其抗血清的制备

编号 zgly0001410057

文献类型 期刊论文

文献题名 甘薯脉花叶病毒外壳蛋白基因在大肠杆菌中的表达及其抗血清的制备

作者 张业辉  秦艳红  乔奇  张德胜  田雨婷  王永江  张振臣 

作者单位 河南省农业科学院植物保护研究所 

母体文献 植物病理学报 

年卷期 2011年01期

年份 2011 

分类号 S432.41 

关键词 甘薯脉花叶病毒  外壳蛋白基因  序列分析  原核表达  抗血清 

文摘内容 根据已报道的甘薯脉花叶病毒(Sweet potato vein mosaic virus,SPVMV)外壳蛋白(CP)基因的核苷酸序列合成引物,利用RT-PCR方法克隆了SPVMV河南分离物(SPVMV-HN)基因组3′端1.8 kb的基因片段,包括部分NIb基因序列和完整的CP基因及3′端非编码区序列(3′UTR)。序列分析表明,SPVMV-HN的CP基因由996个核苷酸组成(GenBank登录号为FJ687211),编码332个氨基酸残基。与已发表的SPVMV其他分离物相比,其推导的氨基酸序列一致性为95.2%~98.5%,与SPVMV广东分离物的氨基酸序列一致性为97.9%。将CP基因克隆到原核表达载体pET-28a(+)上,SDS-PAGE分析表明,经IPTG诱导,CP基因在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中得到了高效表达。以表达的蛋白为抗原,免疫家兔,制备了SPVMV外壳蛋白的特异性抗血清。ACP-ELISA检测结果表明,制备的抗血清可用于田间甘薯样品的检测。利用SPVMV的抗血清,对采自全国14个省(市)的田间甘薯样品以及嫁接的巴西牵牛样品进行了检测,结果表明,SPVMV在我国甘薯上普遍存在。