病毒性出血性败血症病毒(VHSV)实时荧光环介导等温扩增检测方法的建立

编号 zgly0001449312

文献类型 期刊论文

文献题名 病毒性出血性败血症病毒(VHSV)实时荧光环介导等温扩增检测方法的建立

作者 陈进会  陈文  黄伟  李红梅  石磊  邱杨  刘建丽  叶蕾  唐大运 

作者单位 东莞出入境检验检疫局  广州迪澳生物科技有限公司 

母体文献 中国动物检疫 

年卷期 2013年05期

年份 2013 

分类号 S943 

关键词 病毒性出血性败血症病毒  恒温实时荧光  环介导等温扩增 

文摘内容 根据VHSV的较为保守的glyG基因,设计了三套LAMP引物,筛选出扩增效率最优的第二套引物VHSV-2,引入其环引物以加快其反应。采用ESE-Quant tube scanner(德国QIAGEN公司)恒温实时荧光反应及检测平台,反应温度为63℃,恒温下30min内可得出结果。同时评价VHSV引物的灵敏度和特异性,灵敏度结果显示其检测限可达到4.5pg每反应,与几种重要的病原RNA均无交叉反应。本文建立的检测VHSV的RT-LAMP检测方法简单、易操作,同时具有较高的灵敏度和特异性。本研究建立的实时荧光RT-LAMP检测方法可作为VHSV的快速诊断工具,适合VHSV的现场快速检测和大规模监控。