传染性造血器官坏死病毒RT-LAMP检测方法的建立

编号 zgly0001675412

文献类型 期刊论文

文献题名 传染性造血器官坏死病毒RT-LAMP检测方法的建立

作者 韩姝伊  何亚鹏  时晓  杜迎春 

作者单位 河北师范大学  北京市水生野生动植物救护中心 

母体文献 中国动物检疫 

年卷期 2019年07期

年份 2019 

分类号 S941.41 

关键词 传染性造血器官坏死病毒  环介导等温扩增  糖蛋白 

文摘内容 本试验建立了一套逆转录环介导等温扩增方法（reverse transcription loop-mediated isothermal amplification,RT-LAMP）,用于实验室及现场鲑鳟鱼传染性造血器官坏死病毒（infectious haematopoietic necrosisvirus,IHNV）检测。针对IHNV的糖蛋白（glycoprotein,G）基因设计特异性引物,以IHNV基因组RNA为模板,在反转录酶及BstDNA聚合酶的作用下进行RT-LAMP,结果阳性样本表现为荧光绿色,阴性样本仍为红棕色。反应条件优化结果表明,最适反应温度为67℃;特异性试验表明,仅IHNV发生特异性扩增,鲤春病毒血症病毒（SVCV）、牙鲆弹状病毒（HRV）和病毒性出血性败血症病毒（VHSV）均不发生反应;敏感性试验表明,该LAMP方法最低可检出5.0×10-7μg的IHNV核酸。本研究所建立的IHNV检测方法成本低、操作简单、反应迅速,不依赖专门的仪器,同时具有较高的灵敏度和特异性,适合IHNV的现场检测和大批量样品检疫。