编号 zgly0001570906
文献类型 期刊论文
文献题名 病毒性出血性败血症病毒N基因的病毒样颗粒制备及定值
作者单位 山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心
母体文献 中国动物检疫
年卷期 2018年01期
年份 2018
分类号 S941.4
关键词 病毒性出血性败血症病毒 病毒样颗粒 N基因 数字PCR
文摘内容 为制备含有病毒性出血性败血症病毒(VHSV)N基因的RNA病毒样颗粒标准样品,通过RT-RCR扩增VHSV的N基因,将其克隆至含有组氨酸标签的pNH-MS2his载体中,构建重组原核表达载体pNHMS2his-N;将重组质粒pNH-MS2his-N转化至表达菌株BL21(DE3),用1 mmol/L IPTG诱导表达、纯化;对病毒样颗粒进行鉴定及稳定性试验,使用数字PCR对病毒样颗粒进行定值。结果显示,该病毒样颗粒含VHSV N基因序列,并且稳定性良好,定值结果为8×106 copies/m L。结果表明,构建的病毒样颗粒可以作为RNA病毒检测时的标准品和质控品使用。