猪急性腹泻综合征病毒RT-PCR检测方法的建立及应用

编号 zgly0001720838

文献类型 期刊论文

文献题名 猪急性腹泻综合征病毒RT-PCR检测方法的建立及应用

作者 司广斌  陈志飞  梁文清  陈一波  贺东生 

作者单位 华南农业大学兽医学院 

母体文献 中国动物检疫 

年卷期 2020年11期

年份 2020 

分类号 S852.651 

关键词 猪急性腹泻综合征病毒  N基因  RT-PCR  诊断 

文摘内容 为建立一种鉴定猪急性腹泻综合征病毒(SADS-CoV)的RT-PCR方法,根据NCBI登录的SADS-CoV N基因保守区域序列,设计了3对引物(P1、P2和P3),通过对SADS-CoV及其他6种病毒进行检测,筛选出最合适的引物,然后对退火温度、引物浓度、dNTPs浓度、rTaq DNA聚合酶浓度和循环次数等反应条件进行了优化。结果显示,P3引物对SADS-CoV特异性最好,与其他病毒无交叉反应。敏感性试验显示,该方法最低检测限可达9.55×10~2 copies/μL;重复性试验显示该方法重复性良好。运用建立的RT-PCR方法,对广东省的21份临床样品进行检测,结果检出SADS-CoV阳性样品4份,阳性样品的测序结果与其RT-PCR完全一致。结果表明,本研究成功建立了一种鉴定SADS-CoV的RT-PCR方法,且该方法具有检测快速、成本廉价、特异性强、敏感性高和重复性好的优点,可以用于SADS-CoV的临床诊断。