家蚕杆状病毒DNA聚合酶在Bac-to-Bac系统的表达及活性检测

编号 zgly0001515637

文献类型 期刊论文

文献题名 家蚕杆状病毒DNA聚合酶在Bac-to-Bac系统的表达及活性检测

作者 陈慧卿  楚茨  周亚竟 

作者单位 江苏大学生命科学研究院 

母体文献 蚕业科学 

年卷期 2016年06期

年份 2016 

分类号 Q939.4 

关键词 DNA聚合酶  家蚕杆状病毒表达系统  重组蛋白  酶活性 

文摘内容 DNA复制是杆状病毒生活史中最重要的事件,其中DNA聚合酶是病毒复制过程的关键酶。从家蚕杆状病毒(Bm NPV)基因组PCR扩增获得DNA聚合酶基因Bm NPV-pol的序列,利用Bac-to-Bac系统构建重组杆状病毒v Bm NPV-POL,并感染家蚕5龄幼虫,通过SDS-PAGE和Western blotting检测重组Bm NPV-POL蛋白在蚕体内成功表达,经Ni-NTA柱纯化获得了纯度较高的重组Bm NPV-POL蛋白。以poly(d A)/oligo(d T)为模板,比较在原核细胞和家蚕杆状病毒表达系统获得的重组Bm NPV-POL蛋白的酶活性,结果表明在家蚕幼虫体内表达并纯化的重组Bm NPV-POL的酶活性明显较高。利用家蚕杆状病毒表达系统简便、快速获得重组Bm NPV-POL蛋白,有助于后续对Bm NPV复制机制的研究。