人肠道病毒71型类病毒颗粒在家蚕BmN细胞及幼虫体内的表达

编号 zgly0001515715

文献类型 期刊论文

文献题名 人肠道病毒71型类病毒颗粒在家蚕BmN细胞及幼虫体内的表达

作者 黄金山  梁飞  柳林  南文斌  程晨  沈兴家  郝碧芳 

作者单位 江苏科技大学  中国农业科学院蚕业研究所 

母体文献 蚕业科学 

年卷期 2016年03期

年份 2016 

分类号 R373  Q78 

关键词 人肠道病毒71型  病毒样颗粒  衣壳蛋白  家蚕杆状病毒表达系统  Bm N细胞  5龄幼虫 

文摘内容 人肠道病毒71型（human enterovirus 71,EV71）是近年来暴发危害较严重的手足口病的病原。利用家蚕杆状病毒表达系统在家蚕卵巢培养细胞（Bm N）中共表达EV71病毒衣壳蛋白VP1与VP2,分析二者组装成病毒样颗粒（VLPs）的效率,比较用不同启动子构建重组病毒的表达效果,并利用家蚕幼虫进行2种蛋白质的共表达及VLPs纯化条件的研究。结果表明,重组病毒v Bm Bac-vp1-vp2与v Bm Bac-vp1-IRES-vp2均可介导EV71的VP1、VP2蛋白在Bm N细胞中表达,并能够组装成病毒样颗粒,但采用Pph及Pp10启动子的表达和组装效率明显高于Pph及IRES启动子组合;将重组病毒v Bm Bac-vp1-vp2以1×104TCID50/头的剂量注射5龄起蚕,Western blotting检测到VP1在幼虫血淋巴中特异性表达,并且随着感染时间的延长表达量增加;经蔗糖梯度密度离心能够有效地纯化蚕体血淋巴中的病毒样颗粒。研究结果为后续EV71疫苗研制奠定了一定的试验基础。