大肠杆菌表达重组Taq DNA聚合酶的分离和纯化

编号 zgly0000480201

文献类型 期刊论文

文献题名 大肠杆菌表达重组Taq DNA聚合酶的分离和纯化

作者 何钢  王义强  李樊  刘贤桂 

作者单位 中南林业科技大学生物环境科学与技术研究所  中南林业科技大学生命科学与技术学院  中南林业科技大学资源与环境学院 

母体文献 中南林学院学报 

年卷期 2006,26(5)

页码 50-54

年份 2006 

分类号 Q784 

关键词 生物技术  Taq  DNA聚合酶  大肠杆菌  表达  分离  纯化 

文摘内容 以插入Taq DNA聚合酶基因的pET-24a表达质粒转化E.coli菌株+表达Taq DNA聚合酶, 用反复冻融的方法裂解菌体, 表达产物为可溶性蛋白, 采mDuo—Flow系统(Bio—Rad)及S柱, Tris缓冲液pH为7.5, 以0～1mol/L盐梯度洗脱方式, 收集洗脱峰, 透析去盐可得到高纯度的产品。经PCR反应与商品Taq酶的一个活性单位相比较, 重组的Taq酶活性有1个单位。用该方法可以从1L培养液中分离得到5.51mg产品。