宇佐美曲霉E001菌株XynⅡ基因的克隆和融合表达

编号 zgly0001318811

文献类型 期刊论文

文献题名 宇佐美曲霉E001菌株XynⅡ基因的克隆和融合表达

作者 邬敏辰  周晨妍  李剑芳 

作者单位 江南大学医学院  江南大学生物工程学院  江南大学食品学院 江苏无锡214122  江苏无锡214122 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2007年05期

年份 2007 

分类号 Q78 

关键词 宇佐美曲霉  木聚糖酶XynⅡ  基因克隆  融合表达 

文摘内容 以宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001株基因组DNA为模板,PCR扩增了编码木聚糖酶Ⅱ(Xyla-nases,XynⅡ)成熟肽的DNA片段。构建重组克隆质粒pUCm-T-XynⅡ,并以其为摸板,PCR扩增XynⅡ成熟肽的cDNA片段(555 bp),连接于表达质粒pGEX-5X-3的BamHⅠ和EcoRⅠ酶切位点间,构建重组表达质粒pGEX-5X-3-XynⅡ,转化E.coliBL21(DE3),IPTG诱导表达,并对表达产物进行检测。结果表明,XynⅡDNA中存在1个内含子,长度为51 bp;融合蛋白GST-XynⅡ主要以包涵体形式存在,相对分子质量约为50 ku,IPTG诱导1,3和5 h融合蛋白GST-XynⅡ的表达量分别约占菌体总蛋白量的12.6%,25.3%和32.1%。表明宇佐美曲霉E001菌株XynⅡ基因融合表达成功。