字佐美曲霉E001菌株XynⅡ基因的克隆和融合表达

编号 zgly0000484306

文献类型 期刊论文

文献题名 字佐美曲霉E001菌株XynⅡ基因的克隆和融合表达

作者 邬敏辰  周晨妍  李剑芳 

作者单位 江南大学医学院  江南大学生物工程学院  江南大学食品学院 

母体文献 西北农林科技大学学报 

年卷期 2007,35(5)

页码 47-52

年份 2007 

分类号 Q786  Q814 

关键词 宇佐美曲霉  木聚糖酶Xyn  Ⅱ  基因克隆  融合表达 

文摘内容 以宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001株基因组DNA为模板, PCR扩增了编码木聚糖酶Ⅱ(Xylanases, XynⅡ)成熟肽的DNA片段。构建重组克隆质粒pUCm—T-Xyn Ⅱ, 并以其为摸板, PCR扩增XynⅡ成熟肽的cDNA片段(555bp), 连接于表达质粒pGEX-5X-3的BamHⅠ和EcoRⅠ酶切位点间, 构建重组表达质粒pGEX-5X-3-XynⅡ, 转化E.coli;BL21(DE3), IPTG诱导表达, 并对表达产物进行检测。结果表明, XynⅡDNA中存在1个内含子, 长度为51bp; 融合蛋白GST—XynⅡ主要以包涵体形式存在, 相对分子质量约为50ku, IPTG诱导1, 3和5h融合蛋白GST-XynⅡ的表达量分别约占菌体总蛋白量的12.6%, 25.3%和32.1%。表明宇佐美曲霉E001菌株XynⅡ基因融合表达成功。