植物甜蛋白Mabinlin Ⅱ在大肠杆菌中的表达

编号 zgly0000711199

文献类型 期刊论文

文献题名 植物甜蛋白Mabinlin Ⅱ在大肠杆菌中的表达

学科分类 220.20;森林培育学

作者 王昌博  黄东彦  胡文锋  罗文华  李雪玲  颜少帆  陈永泉 

作者单位 华南农业大学食品学院生物工程系应用微生物研究室 

母体文献 现代食品科技 

年卷期 2011,27(4)

页码 384-389

年份 2011 

分类号 Q943 

关键词 甜味蛋白  马槟榔  Mabinlin  Ⅱ  大肠杆菌  诱导表达 

文摘内容 本研究从马槟榔种子中扩增得到天然植物甜蛋白Mabinlin Ⅱ的全长cDNA序列(M1),并通过特异引物PCR去除部分5’端序列得到修饰型的基因序列(M2)。将M1与M2分别克隆至表达载体pET43.1a(+),并分别转化表达宿主菌Escherichia coli BL21(DE3)和Rosetta(DE3),成功构建出BL21(DE3)/pET43.1a-M1(缩写B-M1)、BL21(DE3)/pET43.1a-M2(缩写B-M2)、Rosetta(DE3)/pET43.1a-M1(缩写R-M1)、Rosetta(DE3)/pET43.1a-M2(缩写R-M2)四个表达系统。经IPTG诱导表达后证明,R-M1的重组甜蛋白表达量最高,并可检测到轻微甜味和后甜感。同时利用镍柱对R-M1诱导表达的目的蛋白进行纯化,得到单一条带的重组甜蛋白。