侧孢短芽孢杆菌碱性蛋白酶基因BLG4在枯草芽孢杆菌WB600中的高效表达

编号 zgly0000706394

文献类型 期刊论文

文献题名 侧孢短芽孢杆菌碱性蛋白酶基因BLG4在枯草芽孢杆菌WB600中的高效表达

学科分类 220.30;森林保护学

作者 郭菁  田宝玉  蔡婉玲  黄薇  江贤章  黄建忠 

作者单位 福建师范大学工业微生物教育部工程研究中心 

母体文献 福建农林大学学报: 自然科学版 

年卷期 2011,40(2)

页码 165-171

年份 2011 

分类号 Q503 Q959.17 

关键词 侧孢短芽孢杆菌  侵染性蛋白酶  枯草芽孢杆菌  高效表达  酶学特性  线虫 

文摘内容 侧孢短芽孢杆菌G4菌株在侵染线虫的过程中可以分泌蛋白酶, 降解线虫体壁, 从而帮助细菌侵入宿主体内.在本文中, 侧孢短芽孢杆菌的胞外蛋白酶BLG4基因经克隆后插入到改造后的枯草芽孢杆菌表达载体pWT22中, 构建重组表达质粒pWT22-BLG4.构建成功的重组质粒通过化学转化法转入枯草芽孢杆菌蛋白酶缺失菌株WB600中, 转化子pWT22-BLG4/WB600在IFrG(1.0mmol·L“)的诱导下, 发酵液上清中的蛋白酶活可达到620U·mL^1, 高于出发菌株c4的BLG4酶活(240U-mL^-1).经SDS-PAGE分析, 重组子pWTE2-BLG4/WB600产生了一条分子质量约为30ku的条带, 该条带的大小与侧孢短芽孢杆菌G4上清发酵液中BLG4条带的大小一致.而未经IFrG诱导的重组子pWT22.BLG4和经IPTG诱导的WB600则未出现该条带.结果证明侧孢短芽孢杆菌G4的碱性蛋白酶基因BLG4已在枯草芽孢杆菌WB600中获得了成功表达.重组蛋白酶具有与侧孢短芽孢杆菌G4产生的BLG4蛋白酶同样的酶学性质.同时, 重组蛋白酶具有明显的杀线虫和体壁降解能力, 表明其在线虫生物防治中将有广泛的应用前景。