编号
zgly0001222478
文献类型
期刊论文
文献题名
人雄激素受体的雄激素结合区cDNA在E.coli中的高效表达
作者单位
西南农业大学生化教研组!重庆北碚400716
西南农业大学动物养殖学院
母体文献
动物医学进展
年卷期
2000年01期
年份
2000
分类号
Q786
关键词
人雄激素受体(hAR)
雄激素结合区(LBD)
表达载体(pTrXFus)
表达质粒(pTrxAR)
高效表达
文摘内容
将编码人雄激素受体 ( h AR)的雄素结合区 ( LBD)的 c DNA片段 ( 1 0 0 5 bp)克隆到由 P1 启动子控制的硫氧还蛋白表达载体p Trx Fus上 ,构建了表达质粒 p Trx AR,并转化到大肠杆菌 G1 72 4中。经色氨酸诱导表达后 ,SDS- PAGE分析 ,可观察到一高效表达的融合蛋白产物 ,此融合蛋白的分子量与理论值 ( 47KD)相吻合 ,氨基酸组分分析证明了L BD目的基因的表达。该融合蛋白的表达量可达菌体总蛋白量的 5 0 %左右。尽管采用不同温度诱导 ,该融合蛋白均以不溶的包含体形式存在。应用分子筛技术 ,该融合蛋白在变性剂 (尿素 )存在下 ,可一步分离纯化。此研究结果为进一步进行 LBD的蛋白质复性研究、免疫分析提供了材料 ,也为蛋白质的高效表达提供了实验途径及体系。