编号
zgly0001359413
文献类型
期刊论文
文献题名
李属坏死环斑病毒怀柔分离物CP基因的克隆、原核表达及其抗血清制备
作者单位
中国检验检疫科学院
广东中山出入境检验检疫局技术中心
母体文献
植物保护
年卷期
2009年04期
年份
2009
分类号
S436.62
关键词
李属坏死环斑病毒
外壳蛋白
原核表达
蛋白纯化
抗体
文摘内容
本研究通过RT-PCR技术获得了包含李属坏死环斑病毒怀柔分离物CP蛋白基因的DNA片段,构建了针对pET29a载体的两种表达质粒;转化大肠杆菌BL21(DE3),并经IPTG诱导表达了带不同融合肽段的PNRSV1(25 ku)和PNRSV2(29 ku)融合蛋白。经过Ni-NTA亲和柱与SDS-PAGE分离纯化,获得大量表达融合蛋白,并免疫家兔制备了融合表达蛋白的特异性抗体。间接ELISA测定其效价分别为8×103和3.2×104。