草莓镶脉病毒外壳蛋白抗原表位预测、克隆、表达及鉴定

编号 zgly0001639077

文献类型 期刊论文

文献题名 草莓镶脉病毒外壳蛋白抗原表位预测、克隆、表达及鉴定

作者 杨菊梅  马建忠  潘博  李印武 

作者单位 兰州理工大学生命科学与工程学院  兰州大学第二医院  甘肃启明星节能科技有限公司 

母体文献 植物保护学报 

年卷期 2018年03期

年份 2018 

分类号 S436.68 

关键词 草莓镶脉病毒  外壳蛋白  抗原表位  原核表达  质谱鉴定 

文摘内容 为实现草莓镶脉病毒(Strawberry vein banding virus,SVBV)的简单和快速检测,应用生物信息学方法分析了SVBV外壳蛋白的线性抗原表位及其理化性质,以大肠杆菌的优势密码子对所预测的优势抗表原位进行设计并合成,同时进行了最佳异源表达条件优化。结果表明,第218~238位的氨基酸残基序列为SVBV外壳蛋白的优势抗原表位,其编码片段为5-AE。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)检测结果表明,重组融合蛋白的分子量约为24.8 kD,与其理论分子量20.5 kD基本一致。异源表达优化的结果表明,当IPTG浓度为0.5 mmol/L、温度为40℃、诱导时间为4 h时,重组融合蛋白的表达量最高,为23.6 mg/L。Western blot结果表明重组融合蛋白能与His多克隆抗体起特异性反应。串联质谱结果表明,5-AE肽段氨基酸残基序列正确。