牡丹ACC氧化酶基因片段的克隆及其反义表达载体的构建

编号 zgly0000613692

文献类型 期刊论文

文献题名 牡丹ACC氧化酶基因片段的克隆及其反义表达载体的构建

学科分类 220.5010;园林植物学

作者 施江  高双成  孔祥生  刘素云  郭永新  陈春燕  郁飞燕 

作者单位 河南科技大学农学院 

母体文献 河南农业科学 

年卷期 2009(1)

页码 94-97

年份 2009 

分类号 S685.11 

关键词 牡丹  ACC氧化酶  克隆  反义表达载体 

文摘内容 利用CTAB改良法提取牡丹洛阳红花辩总RNA，通过反转录酶和设计的ACC氧化酶基因特异引物合成709bp目的片段，进行测序和比对，以确定目的片段的正确性。在709bpACC氧化酶基因片段和pBI121植物表达载体上选择合适的酶切位点，进行XbaI和SmaI双酶切。将709bp片段上切下的510bp片段反向插入pBI121植物表达载体35S启动子后面，构建成含510bp牡丹ACC氧化酶基因反义表达载体。最后采用电击法转化进感受态农杆菌GV3101，以备用于花粉管通道法转化牡丹。