砂梨果实ACC氧化酶cDNA克隆及其反义表达载体构建

编号 zgly0000573931

文献类型 期刊论文

文献题名 砂梨果实ACC氧化酶cDNA克隆及其反义表达载体构建

作者 乔玉山  宋长年  渠慎春  胡钟东  熊爱生  姚泉洪  章镇 

作者单位 南京农业大学园艺学院  上海市农业科学院生物技术研究所 

母体文献 园艺学报 

年卷期 2008,35(6)

页码 799-804

年份 2008 

分类号 S661.2 

关键词 砂梨  ACC氧化酶  cDNA  克隆  反义表达载体 

文摘内容 利用RT-PCR和RACE技术从‘早生新水’砂梨成熟果实cDNA中克隆出ACC氧化酶基因保守片段及其5′和3′端，拼接后获得砂梨果实ACC氧化酶cDNA全长。该cDNA全长1225bp，将其命名为Pyp-ACO，GenBank登录号为EF451060。Pyp-ACO核苷酸序列有一个945bp的开放读码框，5′端非翻译区为63bp，3′端非翻译区为217bp，与西洋梨和苹果的编码区核苷酸序列有较高的同源性，分别为98.3%和98.1%。Pyp-ACO推导编码314个氨基酸，该序列具备非血红素二价铁离子依赖型的氧化/加氧酶类的12个保守氨基酸和催化活性所需的3个氨基酸。将Pyp-ACO编码区序列反向插入pYPX145载体，构建了由双35S启动子所控制的双元表达载体，同时已成功将表达载体导入根癌农杆菌菌株LBA4404，为耐贮藏转基因梨选育奠定了基础。