胸膜肺炎放线杆菌APXⅣ部分基因片段的表达及纯化

编号 zgly0001362724

文献类型 期刊论文

文献题名 胸膜肺炎放线杆菌APXⅣ部分基因片段的表达及纯化

作者 刘珊珊  陈征  刘健  王新波  罗满林 

作者单位 华南农业大学兽医学院  国家重点学科预防兽医学家畜传染病实验室  莱芜市畜牧办公室动物疫病预防与控制中心  中国兽医药品监察所 

母体文献 中国动物检疫 

年卷期 2009年07期

年份 2009 

分类号 S852.61 

关键词 APP  APXIV  克隆  表达  纯化 

文摘内容 参照GenBank中已发表的ApxⅣ基因序列,以自行分离的AppDNA为模板,利用PCR方法扩增出ApxⅣ3’端,大小为552bp的保守基因序列。将PCR产物克隆到pMD18-T Simple Vector中,获得重组质粒pMD-ApxⅣ,对其重组质粒pMD-ApxⅣ进行BamHI、HindIII双酶切,并将酶切产物克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,构建了重组表达质粒pET-ApxⅣ。将表达质粒转化至大肠杆菌BL21中,用IPTG诱导表达,通过SDS-PAGE和Western blot分析,结果表明pET-ApxⅣ在BL21中成功表达,并能被App阳性血清所识别,具有良好的免疫原性。表达蛋白的分子质量约为39.5KDa。利用HiTrapFFcrude columns将表达的蛋白进行了纯化。