尾叶桉GLU4肉桂酰-辅酶A还原酶基因克隆及原核表达

编号 zgly0001463073

文献类型 期刊论文

文献题名 尾叶桉GLU4肉桂酰-辅酶A还原酶基因克隆及原核表达

作者 陈博雯  盖颖  蒋湘宁 

作者单位 北京林业大学生物科学与技术学院  广西林科院广西优良用材林资源培育重点实验室 

母体文献 中南林业科技大学学报 

年卷期 2014年11期

年份 2014 

分类号 S792.39 

关键词 尾叶桉  肉桂酰-辅酶A还原酶  生物信息学分析  原核表达 

文摘内容 肉桂酰-辅酶A还原酶(Cinnamoyl Co-A Reductase,CCR)是木质素合成中的关键酶,根据植物中CCR保守序列设计引物,以尾叶桉GLU4嫩茎为材料克隆到其CCR基因,命名为Eu CCR。该基因g DNA长2 918bp,c DNA长1 045 bp,CDS区编码336个氨基酸。EuCCR核酸序列与Gen Bank已登录的桉属植物CCR基因同源性达到96%以上,与伞房属、杯果木属植物CCR的同源性达85%以上,其编码的氨基酸序列经比对发现具有完整FR_SDR_e结构域及NADP结合位点和底物结合位点,与可可树等植物中CCR基因编码序列同源性也在84%以上,确定为CCR基因。对EuCCR蛋白序列理化性质及结构进行生物信息学分析,利用MEGA软件对基因序列进行系统进化树分析。采用pQE30/M15系统对EuCCR进行原核表达,重组质粒成功表达分子量约36 kD的目的蛋白。本研究从尾叶桉GLU4中克隆得到EuCCR基因并原核表达,为该基因的酶学分析以及利用该基因转化调控尾叶桉木质素合成奠定基础。