黑曲霉胞外耐高糖β-葡萄糖苷酶的分离纯化及部分特性研究

编号 zgly0001317781

文献类型 期刊论文

文献题名 黑曲霉胞外耐高糖β-葡萄糖苷酶的分离纯化及部分特性研究

作者 赵林果  游丽金  孟鹏  余世袁 

作者单位 南京林业大学化学工程学院  南京林业大学化学工程学院 江苏南京210037  江苏南京210037 

母体文献 林产化学与工业 

年卷期 2007年06期

年份 2007 

分类号 TQ920.1 

关键词 β-葡萄糖苷酶  耐高糖  提纯  黑曲霉 

文摘内容 采用硫酸铵盐析、Phenyl Sepharose CL-4B疏水层析、DEAE-Sepharose阴离子交换层析、Sephacryl S-200凝胶过滤层析等步骤,从黑曲霉的发酵液中获得了凝胶电泳均一的两种β-葡萄糖苷酶。其中一种为耐高糖的β-葡萄糖苷酶,葡萄糖抑制系数(Ki)为41.01 mmol/L,纯化倍数和得率分别为56.7倍和22.66%。耐高糖β-葡萄糖苷酶单亚基分子质量为114.6 ku,以对硝基苯酚-β-D-葡萄糖苷(pNPG)为底物时,米氏常数(Km)值和酶促反应的最大速率(vmax)分别为0.904 mmol/L和1.08μmol/min。该酶最适反应温度60℃,最适反应pH值为4.0;在60℃以下及pH值3~7范围内均能保持稳定。所测定的化学试剂中,Ag+对酶具有较强的抑制作用,其它金属离子及乙二胺四乙酸对酶的活性影响不大。甲醇、正丁醇有明显激活酶活性的作用,但乙腈、丙酮对酶的抑制作用明显。