建兰花叶病毒RdRp基因的原核表达及多克隆抗体制备

编号 zgly0001545080

文献类型 期刊论文

文献题名 建兰花叶病毒RdRp基因的原核表达及多克隆抗体制备

作者 万晴姣  吴正强  李欲轲  乙引  龚记熠  刘倩  洪鲲 

作者单位 贵州师范大学生命科学学院  贵州省植物生理与发育调控重点实验 

母体文献 植物病理学报 

年卷期 2017年03期

年份 2017 

分类号 S432.41 

关键词 建兰花叶病毒  RdRp  原核表达  多克隆抗体 

文摘内容 采用RT-PCR技术扩增出建兰花叶病毒贵州分离物（CyMV-GZ）的依赖RNA的RNA聚合酶（RNA-dependent RNA polymerase,RdRp）基因保守序列。测序结果表明:该RdRp基因序列长735 bp,编码245个氨基酸残基。构建原核表达载体pET32a（+）-RdRp,将重组质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）,在37℃以0.3 mmol·L-1 IPTG诱导表达分子量约49 kDa重组蛋白。以该重组蛋白为抗原免疫小鼠,制备的抗体效价达1∶204 800。间接ELISA检测显示该多抗与CyMV病叶汁发生特异性免疫反应,而与其他6种同属或不同属病毒叶汁无血清学交叉反应。本实验为进一步研究RdRp的功能以及从分子水平上探讨该病毒的致病机制奠定了基础。