标记蛋白HPT的表达、纯化及免疫活性鉴定

编号 zgly0001411378

文献类型 期刊论文

文献题名 标记蛋白HPT的表达、纯化及免疫活性鉴定

作者 高彬  张海燕  范海 

作者单位 山东师范大学逆境植物重点实验室  中国科学院植物研究所 

母体文献 植物研究 

年卷期 2011年01期

年份 2011 

分类号 Q943.2 

关键词 潮霉素磷酸转移酶  原核表达  重组蛋白  多克隆抗体 

文摘内容 构建含有HPT的原核表达质粒,经诱导表达纯化后获得HPT抗体。从含有hpt的质粒pCambia1301上扩增目的基因,经SalⅠ和NotⅠ双酶切后与原核表达载体pET-28b(+)进行粘性末端连接,成功构建了pET-28b-hpt质粒,并转化到宿主细菌大肠杆菌Rosset(DE3)中进行蛋白表达。在异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导下,pET-28b-hpt原核表达载体在E.coli Rosset菌株中以包涵体的形式高效表达了HPT蛋白,并以纯化的目的蛋白为抗原免疫兔制备了多克隆抗体。利用本方法可以获得特异性强、灵敏度高的多克隆抗体。