川西獐牙菜SmSLS2基因的克隆、生物信息学及表达分析

编号 zgly0001669757

文献类型 期刊论文

文献题名 川西獐牙菜SmSLS2基因的克隆、生物信息学及表达分析

作者 李文静  冯雨  侯晓强  孙艳香  韩美玲  李晓雪  王勇  向蓓蓓 

作者单位 廊坊师范学院生命科学学院  南开大学生命科学学院  天津中医药大学中药学院 

母体文献 植物研究 

年卷期 2019年03期

年份 2019 

分类号 Q943.2  S567.239 

关键词 川西獐牙菜  裂环马钱子苷合成酶2  基因克隆  生物信息学分析  原核表达 

文摘内容 裂环马钱子苷合成酶（SLS）是环烯醚萜类化合物合成途径的限速酶。该研究根据川西獐牙菜转录组信息获得SmSLS2基因序列,对该基因进行克隆、生物信息分析、原核表达载体构建及蛋白体外诱导。结果表明SmSLS2 cDNA全长1 566 bp（GenBank编号MH535904）,编码521个氨基酸,推测其蛋白相对分子质量为59. 79kDa,等电点为8. 92。结构域分析表明SmSLS2含一个跨膜结构域,SmSLS2的gDNA全长为2 576 bp,含5个外显子和4个内含子。SmSLS2蛋白与其他植物中SLS蛋白具有高度的相似性。进一步将SmSLS2构建到原核表达载体pET-28a-sumo上,转入大肠杆菌BL21（DE3）中,在37℃、0. 5 mmol·L-1IPTG条件下进行原核表达,诱导出与预测蛋白大小一致的目的蛋白。该研究成功从川西獐牙菜中克隆了SmSLS2,为进一步阐明该基因在环烯醚萜合成途径中的作用和通过基因工程手段改良环烯醚萜类化合物产量提供了理论基础。