百合斑驳病毒外壳蛋白基因原核表达、抗血清制备及其应用

编号 zgly0001554605

文献类型 期刊论文

文献题名 百合斑驳病毒外壳蛋白基因原核表达、抗血清制备及其应用

作者 徐品三  宋炯  张郑瑶 

作者单位 大连理工大学生命科学与技术学院  大连理工大学生命与医药学院 

母体文献 植物保护学报 

年卷期 2017年04期

年份 2017 

分类号 S436.8 

关键词 百合斑驳病毒  外壳蛋白基因  原核表达  抗血清制备 

文摘内容 为了建立百合斑驳病毒(Lily mottle virus,LMoV)的快速检测方法,采用RT-PCR方法从感染LMoV的百合叶片中克隆该病毒的外壳蛋白(coat protein,CP)基因,然后连接到原核表达载体pET28a(+)上,导入大肠杆菌Escherichia coliBL21(DE3)并诱导表达,以表达的重组蛋白为抗原制备该病毒的抗血清。结果显示:LMoVCP全长为822 bp,编码274个氨基酸;SDS-PAGE及Western blot检测结果表明,经IPTG诱导得到了分子量约为34 kD带有HIS标签的目的蛋白;用该蛋白制备的抗血清经间接ELISA和Western blot检测结果显示,其效价为1∶51 200,具有较高的特异性,可用于感染LMoV百合的检测,其检测结果与RT-PCR检测结果一致。