甘薯褪绿斑病毒外壳蛋白的分子变异及其特异抗血清制备

编号 zgly0001467126

文献类型 期刊论文

文献题名 甘薯褪绿斑病毒外壳蛋白的分子变异及其特异抗血清制备

作者 乔奇  秦艳红  张德胜  田雨婷  王爽  王永江  张振臣 

作者单位 河南省农业科学院植物保护研究所  河南省农作物病虫害防治重点实验室  农业部华北南部作物有害生物综合治理重点实验室 

母体文献 植物病理学报 

年卷期 2014年06期

年份 2014 

分类号 S435.311 

关键词 甘薯褪绿斑病毒  外壳蛋白  分子变异  原核表达  抗血清制备 

文摘内容 甘薯褪绿斑病毒(Sweet potato chlorotic fleck virus,SPCFV)是侵染甘薯的主要病毒之一。本研究利用RT-PCR方法克隆了SPCFV中国4个分离物的外壳蛋白(CP)基因。序列分析表明,cp基因全长900 bp,编码299个氨基酸残基。4个分离物cp基因的核苷酸序列一致性为78.3%~89.9%,推导的氨基酸序列一致性为91.3%~95.7%,存在较大的分子变异。不同分离物CP氨基酸序列N末端的第3-32位氨基酸为多变区。将四川分离物的cp基因克隆到原核表达载体p ET-28a(+)上,SDS-PAGE分析表明,经IPTG诱导,cp基因在大肠杆菌BL21(DE3)中得到了高效表达。以表达的蛋白为抗原免疫家兔,制备了SPCFV CP的特异性抗血清。ACP-ELISA检测结果表明,制备的抗血清效价达1∶128 000,可用于田间甘薯样品的检测。