伪狂犬病病毒UL24基因的原核表达及抗UL24蛋白抗体的制备

编号 zgly0000513900

文献类型 期刊论文

文献题名 伪狂犬病病毒UL24基因的原核表达及抗UL24蛋白抗体的制备

作者 于春梅  李鹏  郑其升  李斐  苏鑫铭  曹瑞兵  周斌  陈溥言 

作者单位 南京农业大学动物医学院农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室 

母体文献 西北农林科技大学学报 

年卷期 2007,35(9)

页码 10-14

年份 2007 

分类号 Q786 

关键词 伪狂犬病毒  UL24基因  原核表达  抗体制备 

文摘内容 为了给伪狂犬病病毒(PrV)UL24蛋白的细胞定位和功能研究提供参考依据,据GenBank公布的PrVUL24基因序列(登录号NC006151)设计1对引物,以质粒pUL24-GFP为模板,用PCR方法扩增出部分缺失的基因片段mUL24(modified UL24)。将mUL24片段定向克隆到原核表达载体pET-32a(＋)中,构建融合表达载体pET-UL24。阳性质粒转化宿主菌E.coliBL21(DE3),经IPTG诱导,重组蛋白(His)6-UL24以包涵体的形式获得表达。用纯化后的pET-UL24融合蛋白免疫家兔,ELISA分析表明,在血清效价达到1∶2 560以上,Western-blot分析制备的抗体可以和pET-UL24表达产物发生反应,具有良好的免疫特异性。