无选择标记的植物表达载体的构建

编号 zgly0001338075

文献类型 期刊论文

文献题名 无选择标记的植物表达载体的构建

作者 辛翠花  刘庆昌  屈冬玉  黄三文 

作者单位 中国农业大学农学与生物技术学院  中国农业科学院蔬菜花卉研究所 北京100094  中国农业科学院蔬菜花卉研究所  北京100081  北京100094  北京100081卉研究所 

母体文献 园艺学报 

年卷期 2008年05期

年份 2008 

分类号 Q943.2 

关键词 无标记转化  载体构建  转基因  番茄 

文摘内容 以双元载体pBINPLUS为基础,在T-DNA侧翼区通过2次特异PCR、酶切和连接相结合的方法,构建了1个无标记载体pBINMF(marker-free vector)。通过酶切后测序分析,这个无标记载体在T-DNA左、右边界之间只有1个多克隆位点(multiple cloned sites,MCS)。为了验证该载体的遗传稳定性,将gus基因克隆到该载体上并通过农杆菌介导的方法转化番茄栽培品种‘Moneymaker’,特异PCR扩增目的基因和GUS组织染色结果表明,gus基因已经整合进入番茄基因组并得以表达。该载体为今后直接获得无标记基因、生物安全的转化体,尤其可为马铃薯、木薯等无性繁殖材料的无标记基因转化提供可靠、有效的工具。