粟酒裂殖酵母麦芽糖酶基因的克隆及在大肠杆菌内的表达

编号 zgly0000518429

文献类型 期刊论文

文献题名 粟酒裂殖酵母麦芽糖酶基因的克隆及在大肠杆菌内的表达

作者 姚淑敏  池振明 

作者单位 曲阜师范大学生命科学学院  中国海洋大学生命科学学院 

母体文献 曲阜师范大学学报：自然科学版 

年卷期 2007,33(4)

页码 99-103,128

年份 2007 

分类号 Q949.326.1 

关键词 粟酒裂殖酵母  麦芽糖酶  基因克隆  超表达 

文摘内容 利用PCR的方法，以粟酒裂殖酵母菌的染色体DNA为模板，扩增得到粟酒裂殖酵母的结构基因，其开放阅读框1740 bp的序列，可以编码579氨基酸，分子量为67.7 kD.利用NCBI对它的蛋白序列进行比对，发现这个蛋白序列与Aspergillus oryza、Candida albicans、Hansenula polymorpha、Saccharomyces cerevisiae、Saccharomyces pastorianus的麦芽糖酶相比分别具有40.6%、41.6%、37.9%、34.7%、34.5%的相似性.而与粟酒裂殖酵母的α-葡萄糖苷酶具有99.8%的相似性，由此可以得出克隆得到的结构基因应该是粟酒裂殖酵母的麦芽糖酶结构基因.将克隆的粟酒裂殖酵母的麦芽糖酶基因克隆到pQE30表达载体中在大肠杆菌中进行诱导表达，然后测定其麦芽糖酶的活力，其酶的比活力是野生菌株的21倍，诱导条件下麦芽糖酶的比活力是非诱导条件下的10倍。