辣椒轻斑驳病毒cp基因的原核表达及抗血清制备

编号 zgly0001557416

文献类型 期刊论文

文献题名 辣椒轻斑驳病毒cp基因的原核表达及抗血清制备

作者 洪鲲  郑兴华  李欲轲  龚记熠  乙引  万晴姣 

作者单位 贵州师范大学生命科学学院  贵州省植物生理与发育调控重点实验室 

母体文献 植物病理学报 

年卷期 2017年05期

年份 2017 

分类号 S436.418 

关键词 辣椒轻斑驳病毒  外壳蛋白  原核表达  抗血清 

文摘内容 辣椒轻斑驳病毒(Pepper mild mottle virus,PMMoV)属于烟草花叶病毒属,是辣椒的重要病毒种类之一。将PMMoV的外壳蛋白(cp)基因克隆至原核表达载体pET32a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,重组PMMoV CP蛋白以可溶形式表达,纯化后获得分子量约35 kDa的融合CP蛋白。以该重组蛋白为抗原免疫新西兰兔制备了PMMoV CP特异性抗血清。Western blot检测结果表明该抗血清与重组CP蛋白发生强烈的免疫反应,间接酶联免疫吸附测定(ID-ELISA)结果显示该抗血清针对重组CP蛋白的效价达1∶25 600,针对PMMoV病汁液的效价达1∶4 000,检测灵敏度为1∶3 200,且该抗血清不与PMMoV同属或不同属的其它6种病毒汁液发生免疫反应,具有较好的特异性。利用该抗血清对42份田间辣椒病样进行检测,阳性率达38%,与进口商品化试剂盒检测结果一致,说明该抗血清可用于PMMoV的ELISA诊断。